多重扩增子测序用引物系统、其应用以及测序文库的构建方法

基本信息

申请号 CN201710814297.9 申请日 -
公开(公告)号 CN109486923B 公开(公告)日 2022-02-18
申请公布号 CN109486923B 申请公布日 2022-02-18
分类号 C12Q1/6869(2018.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 罗景燕;唐毅;何广良;林钊;李伟琴;许少飞;赖炳权;周艳河 申请(专利权)人 广州永诺生物科技有限公司
代理机构 广州华进联合专利商标代理有限公司 代理人 林青中;万志香
地址 510300广东省广州市开发区广州国际生物岛螺旋三路6号第四层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种多重扩增子测序用引物系统、其应用及测序文库的构建方法。该引物系统包括第一轮反向特异性引物组和第二轮正向特异性引物组。其中第一轮反向特异性引物组包括多个不同的第一轮反向特异性引物,每个所述反向特异性引物从5’端至3’端分别为反向接头序列、条形码序列和反向特异性序列。分子条形码序列提供了一种很好的方法来跟踪错配,利用下游分析,聚合酶在PCR过程中产生的错配可以与原始分子中出现的序列变异区分开来,最后通过去除低水平的假阳性来提高1%或更低的突变的检测准确率。通过计算读数中唯一的分子条形码序列数量,而不是计算总读数的数量,也可以更好地实现目标量化,因为总读数更有可能被非均一性扩增的所误读。