一种尿激酶中间体的纯化方法

基本信息

申请号 CN202010653775.4 申请日 -
公开(公告)号 CN111647587A 公开(公告)日 2020-09-11
申请公布号 CN111647587A 申请公布日 2020-09-11
分类号 C12N9/72(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 顾京;唐维;倪萌;韩庆坤;黄俊杰 申请(专利权)人 江苏尤里卡生物科技有限公司
代理机构 北京精金石知识产权代理有限公司 代理人 江苏尤里卡生物科技有限公司
地址 211200江苏省南京市溧水开发区中兴东路22号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种尿激酶中间体的纯化方法,涉及生物工程、化学工程领域。具体包括以下步骤:(1)取尿液、吸附,洗脱,收集洗脱液;(2)洗脱液进行沉淀,过滤,收集沉淀物,即得人尿激酶粗品;(3)取人尿激酶粗品,溶解,过滤后经葡聚糖凝胶层析,收集洗脱液,得到尿激酶中间体粗品;(4)取尿激酶中间体粗品,溶解后调节pH和电导,然后经过亲和琼脂糖凝胶层析柱,洗脱,收集洗脱液,即得高纯度尿激酶中间体。实施过程中采用亲和琼脂糖凝胶层析,结合其他工艺条件的优化,如平衡缓冲液配方、洗脱缓冲液配方、洗脱方法、pH、电导等,使最终得到的尿激酶的活性收率提高到90%以上,纯度提高到85%以上。