一种粗品尿激酶的纯化方法
基本信息
| 申请号 | CN202010663049.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111662896A | 公开（公告）日 | 2020-09-15 |
| 申请公布号 | CN111662896A | 申请公布日 | 2020-09-15 |
| 分类号 | C12N9/72(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 顾京;郭芬;张茜;韩庆坤;熊心磊;丁晶 | 申请（专利权）人 | 江苏尤里卡生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 北京精金石知识产权代理有限公司 | 代理人 | 江苏尤里卡生物科技有限公司 |
| 地址 | 211200江苏省南京市溧水开发区中兴东路22号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种粗品尿激酶的纯化方法，涉及生物工程及化学工程领域，该纯化方法包括以下步骤：(1)将新鲜男性尿液加入硅胶吸附，用水冲洗硅胶，氨水洗脱，收集洗脱液，向洗脱液中加入固体硫酸铵进行沉淀，过滤收集棕色的尿激酶沉淀，即为人尿激酶粗品；(2)使用平衡缓冲液平衡层析柱，待紫外、pH和电导稳定后，将步骤(1)得到的人尿激酶粗品溶解并上样，经过滤、葡聚糖凝胶层析后，使用洗脱液进行洗脱至直至UV280nm<0.1，收集洗脱液，得到尿激酶中间品；(3)使用异丙醇和NaOH溶液清洗层析柱，再用注射水冲洗至中性。从而实现了尿激酶粗品的高效回收，尿激酶的活性收率可达70％以上，满足量产经济效益要求。 |
