基于克隆DNA混合池的全基因组测序方法
基本信息
申请号 | CN201310288791.8 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN103388025B | 公开(公告)日 | 2015-04-29 |
申请公布号 | CN103388025B | 申请公布日 | 2015-04-29 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 罗美中;潘永龙 | 申请(专利权)人 | 武汉华中农大资产经营有限公司 |
代理机构 | 武汉开元知识产权代理有限公司 | 代理人 | 华中农业大学 |
地址 | 430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种基于克隆DNA混合池的全基因组测序方法。该方法首先构建BAC文库并构建BAC克隆DNA混合池,对混合池DNA进行双末端的高通量测序;解析克隆的特征序列集合与k-mer集合,利用克隆的特征序列构建克隆重叠群,利用克隆重叠群将克隆k-mer集合分割成小的k-mer集合,将混合池的NGS序列进行组装,并将组装后的序列定位到克隆重叠群上;将组装后的序列与NGS序列进行双末端比对,根据比对结果连接定位后的序列,并确定它们的方向;最后利用分子标记确定克隆重叠群的相对位置与方向,将克隆重叠群的序列连接成染色体序列。本发明利用NGS高通量测序技术与克隆DNA混合池,不仅构建出全基因组的物理图谱,同时将拼装后的序列定位到物理图谱上,实现两者的整合。 |
