基于克隆DNA混合池的全基因组测序方法

基本信息

申请号 CN201310288791.8 申请日 -
公开(公告)号 CN103388025B 公开(公告)日 2015-04-29
申请公布号 CN103388025B 申请公布日 2015-04-29
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 罗美中;潘永龙 申请(专利权)人 武汉华中农大资产经营有限公司
代理机构 武汉开元知识产权代理有限公司 代理人 华中农业大学
地址 430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种基于克隆DNA混合池的全基因组测序方法。该方法首先构建BAC文库并构建BAC克隆DNA混合池,对混合池DNA进行双末端的高通量测序;解析克隆的特征序列集合与k-mer集合,利用克隆的特征序列构建克隆重叠群,利用克隆重叠群将克隆k-mer集合分割成小的k-mer集合,将混合池的NGS序列进行组装,并将组装后的序列定位到克隆重叠群上;将组装后的序列与NGS序列进行双末端比对,根据比对结果连接定位后的序列,并确定它们的方向;最后利用分子标记确定克隆重叠群的相对位置与方向,将克隆重叠群的序列连接成染色体序列。本发明利用NGS高通量测序技术与克隆DNA混合池,不仅构建出全基因组的物理图谱,同时将拼装后的序列定位到物理图谱上,实现两者的整合。