一种适用于狐尾藻的Hi-C高通量测序建库方法
基本信息
申请号 | CN201910213099.6 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN109913529A | 公开(公告)日 | 2019-06-21 |
申请公布号 | CN109913529A | 申请公布日 | 2019-06-21 |
分类号 | C12Q1/6806(2018.01)I; C40B50/06(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 冯欢 | 申请(专利权)人 | 嘉兴菲沙基因信息有限公司 |
代理机构 | 上海精晟知识产权代理有限公司 | 代理人 | 冯子玲 |
地址 | 314000 浙江省嘉兴市嘉善县大云镇创业路555号C2幢101室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及适用于狐尾藻的Hi‑C高通量测序建库方法,包括:1)对狐尾藻样品进行甲醛交联获得交联物料;2)细胞裂解释放染色质;3)收集染色质并依次经SDS灭活内源酶、MboI核酸内切酶酶切打断获得酶切后物料;4)末端补平,获得末端补平后DNA,并对末端补平DNA进行分子内连接;5)解交联分子内连接物料并纯化DNA,DNA打断形成利于测序的片段;7)构建用于高通量测序的Hi‑C文库;8)特异性捕获标记了生物素的DNA片段并PCR扩增;9)文库质检。该方法针对狐尾藻细胞的特殊结构,设计合适的细胞破碎方法、甲醛交联条件、内源酶灭活条件以及合适的工具酶,解决了狐尾藻细胞壁结构对Hi‑C实验的影响,实现了狐尾藻的Hi‑C高通量测序建库,扩大了Hi‑C技术的适用范围。 |
