一种基于鲤鱼上皮瘤细胞EPC的鳜鱼传染性脾肾坏死病毒ISKNV的增殖方法

基本信息

申请号 CN201610536389.0 申请日 -
公开(公告)号 CN105950571B 公开(公告)日 2019-08-23
申请公布号 CN105950571B 申请公布日 2019-08-23
分类号 C12N7/00;C12R1/93 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 周伟东;邓平;喻运珍;喻婷;张立强;周勇;徐洪亮;艾桃山;林蠡;周裕和 申请(专利权)人 武汉市农业科学技术研究院水产科学研究所
代理机构 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 代理人 乔宇;徐晓琴
地址 430065 湖北省武汉市洪山区白沙洲大道173号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于鲤鱼上皮瘤细胞EPC的鳜鱼传染性脾肾坏死病毒ISKNV的增殖方法。所述增殖方法为:培养EPC细胞系;用ISKNV感染EPC细胞,恒温培养后收集培养液上清;再用培养液上清中的ISKNV感染EPC细胞,重复操作2~3次,ISKNV毒种复壮后,取培养液上清液氮保存,作为ISKNV扩增毒种;用复壮后的ISKNV毒种感染EPC细胞,恒温培养至CPE>80%,收集上清液,获得ISKNV病毒粒子。本发明以EPC细胞系作为ISKNV感染的敏感细胞,EPC细胞系商品化程度高,易于获得,容易培养,并且和鳜鱼的亲缘关系较远,可大大降低ISKNV用于灭活疫苗时的纯化难度,减少不良反应。