一种基于鲤鱼上皮瘤细胞EPC的鳜鱼传染性脾肾坏死病毒ISKNV的增殖方法
基本信息
申请号 | CN201610536389.0 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN105950571B | 公开(公告)日 | 2019-08-23 |
申请公布号 | CN105950571B | 申请公布日 | 2019-08-23 |
分类号 | C12N7/00;C12R1/93 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 周伟东;邓平;喻运珍;喻婷;张立强;周勇;徐洪亮;艾桃山;林蠡;周裕和 | 申请(专利权)人 | 武汉市农业科学技术研究院水产科学研究所 |
代理机构 | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 | 代理人 | 乔宇;徐晓琴 |
地址 | 430065 湖北省武汉市洪山区白沙洲大道173号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于鲤鱼上皮瘤细胞EPC的鳜鱼传染性脾肾坏死病毒ISKNV的增殖方法。所述增殖方法为:培养EPC细胞系;用ISKNV感染EPC细胞,恒温培养后收集培养液上清;再用培养液上清中的ISKNV感染EPC细胞,重复操作2~3次,ISKNV毒种复壮后,取培养液上清液氮保存,作为ISKNV扩增毒种;用复壮后的ISKNV毒种感染EPC细胞,恒温培养至CPE>80%,收集上清液,获得ISKNV病毒粒子。本发明以EPC细胞系作为ISKNV感染的敏感细胞,EPC细胞系商品化程度高,易于获得,容易培养,并且和鳜鱼的亲缘关系较远,可大大降低ISKNV用于灭活疫苗时的纯化难度,减少不良反应。 |
