一种重组IL-6蛋白的制备方法及其应用
基本信息
申请号 | CN202111669367.9 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN114195880A | 公开(公告)日 | 2022-03-18 |
申请公布号 | CN114195880A | 申请公布日 | 2022-03-18 |
分类号 | C07K14/54(2006.01)I;C12N15/24(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I | 分类 | 有机化学〔2〕; |
发明人 | 许行尚;杰弗瑞·陈;朱道云;熊凯 | 申请(专利权)人 | 江苏华控生物科技有限公司 |
代理机构 | 南京北辰联和知识产权代理有限公司 | 代理人 | 陆中丹 |
地址 | 210000江苏省南京市江宁区乾德路2号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种重组IL‑6蛋白的制备方法及其应用,制备方法包括以下步骤:S1重组人IL‑6基因片段扩增;S2IL‑6表达载体pCDNA3.1(+)‑IL6的构建;S3将表达载体pCDNA3.1(+)‑IL6转染至HEK293细胞株:S4重组IL‑6表达:筛选不同克隆的细胞株培养基上清,收集经过表达的细胞株培养基上清,得重组IL‑6蛋白。原核表达系统表达的IL‑6不能与天然蛋白形成完全一致的蛋白折叠,可能导致表达出的蛋白活性及抗原表位与天然蛋白有较大差距;使用人胚肾细胞(HEK293)作为表达宿主,表达出折叠准确、修饰正确的重组蛋白。 |
