一种重组IL-6蛋白的制备方法及其应用

基本信息

申请号 CN202111669367.9 申请日 -
公开(公告)号 CN114195880A 公开(公告)日 2022-03-18
申请公布号 CN114195880A 申请公布日 2022-03-18
分类号 C07K14/54(2006.01)I;C12N15/24(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I 分类 有机化学〔2〕;
发明人 许行尚;杰弗瑞·陈;朱道云;熊凯 申请(专利权)人 江苏华控生物科技有限公司
代理机构 南京北辰联和知识产权代理有限公司 代理人 陆中丹
地址 210000江苏省南京市江宁区乾德路2号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种重组IL‑6蛋白的制备方法及其应用,制备方法包括以下步骤:S1重组人IL‑6基因片段扩增;S2IL‑6表达载体pCDNA3.1(+)‑IL6的构建;S3将表达载体pCDNA3.1(+)‑IL6转染至HEK293细胞株:S4重组IL‑6表达:筛选不同克隆的细胞株培养基上清,收集经过表达的细胞株培养基上清,得重组IL‑6蛋白。原核表达系统表达的IL‑6不能与天然蛋白形成完全一致的蛋白折叠,可能导致表达出的蛋白活性及抗原表位与天然蛋白有较大差距;使用人胚肾细胞(HEK293)作为表达宿主,表达出折叠准确、修饰正确的重组蛋白。