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重组 TRAIL 包含体蛋白的工业化提取、复性和纯化方法

基本信息

申请号 CN03141811.2 申请日 -
公开（公告）号 CN1473843A 公开（公告）日 2004-02-11
申请公布号 CN1473843A 申请公布日 2004-02-11
分类号 C07K1/14 分类 有机化学〔2〕;
发明人 沈亚领;魏东芝;夏小霞 申请（专利权）人 上海恰尔生物技术有限公司
代理机构 上海顺华专利代理有限责任公司 代理人 陈淑章
地址 200237上海市徐汇区梅陇路130号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种重组TRAIL包含体蛋白的工业化提取、复性与纯化方法。该法利用表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(简称TRAIL)的重组大肠杆菌菌体为原料，先进行破碎、洗涤等预处理提取获得纯度＞80％的TRAIL包含体；然后将上述包含体用变性剂进行溶解，得到变性溶解液；再将上述所得的包含体变性溶解液用稀释法进行复性，再用两步透析法除去残留的变性剂，得到含有TRAIL活性蛋白的复性液，最后将上述复性液经超滤浓缩，上柱层析分离等步骤，收集合格的洗脱液，即得本发明的目标产物，一种具有与可溶性表达蛋白活性相近的复性重组TRAIL蛋白，其得率可达40％以上。