一种大肠杆菌高效外分泌表达溶葡萄球菌酶的方法

基本信息

申请号 CN200680026815.0 申请日 -
公开(公告)号 CN101228271B 公开(公告)日 2011-10-26
申请公布号 CN101228271B 申请公布日 2011-10-26
分类号 C12N15/00(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N9/48(2006.01)I;C12N9/52(2006.01)I;C12N1/20(2006.01)I;C07K14/31(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 黄青山;陆婉英;陆海荣 申请(专利权)人 江苏博连生物工程有限公司
代理机构 中原信达知识产权代理有限责任公司 代理人 上海高科联合生物技术研发有限公司
地址 201206 上海市浦东新区金港路501号B座3层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供一种大肠杆菌高效外分泌表达溶葡萄球菌酶的方法,包括将适合在大肠杆菌中分泌表达的编码信号肽的序列克隆于部分或全部成熟溶葡萄球菌酶的基因序列前,并与启动子相连,构建表达载体;将表达载体转化大肠杆菌,培养发酵;从发酵液上清液中分离溶葡萄球菌酶。外分泌表达的优点在于表达产物以最终的活性形式存在于培养基中,无包涵体复性等步骤;从培养上清中纯化较简单,回收率高;宿主菌蛋白污染少。