一种快速准确检测番茄黄化曲叶病毒的方法
基本信息
申请号 | CN201210000614.0 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN102426234B | 公开(公告)日 | 2014-06-25 |
申请公布号 | CN102426234B | 申请公布日 | 2014-06-25 |
分类号 | G01N33/569(2006.01)I;G01N21/31(2006.01)I | 分类 | 测量;测试; |
发明人 | 乔宁;李美芹;竺晓平;刘永光;王兴翠;国家进 | 申请(专利权)人 | 山东省蔬菜工程技术研究中心有限公司 |
代理机构 | 济南泉城专利商标事务所 | 代理人 | 李桂存 |
地址 | 262700 山东省潍坊市寿光市学院路166号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及基因工程中病毒检测技术领域一种快速准确检测番茄黄化曲叶病毒的方法:从病叶总DNA中克隆得到TYLCV-CP基因片段,与pET-32a连接转化受体菌,对阳性菌落诱导表达并纯化出目的蛋白;免疫家兔制备抗血清,对纯化的抗体进行碱性磷酸酶标记,使用DAS-ELISA方法对待检病株进行检测。本发明检测番茄黄化曲叶病毒的方法,其灵敏度高,可用于定性、定量分析,最低检测限为9.75ng/mL;操作简单快速,可在数小时内完成;特异性强,重复性好,针对番茄黄化曲叶病毒有非常明显的免疫学反应;可靠性高,其检出准确率与PCR法非常接近;检测成本低廉,试剂用量少并可以较长时间保存,非常适合大规模的常规检测。 |
