一种用于检测猪Kobu病毒的检测试剂盒

基本信息

申请号 CN201210271607.4 申请日 -
公开(公告)号 CN102925586A 公开(公告)日 2013-02-13
申请公布号 CN102925586A 申请公布日 2013-02-13
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 徐志文;李雪梅;朱玲;刘孟良;周远成 申请(专利权)人 四川川娇农牧科技股份有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 625014 四川省雅安市雨城区新康路46号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种用于检测猪Kobu病毒的检测试剂盒,检测50个样品的试剂盒组成如下:试剂A:TRIZOL?20ml、氯仿5ml、异丙醇12.5ml、75%乙醇10ml、RNasa-free水1ml;试剂B:5×PrimeScript?Buffer?100μl、PrimeScript?RT?Enzyme?Mix?I?25μl、Oligo?dT?Primer?25μl、Random?6?mers?100μl、RNase?Free?dH2O?250μl;试剂C:上游引物P1?25μl、下游引物P2?25μl、SYBR?Green?I染料500μl、ddH2O?160μl;上游引物P1:5’-GGACCCAGACACTTACGAACA-3’;下游引物P2:5’-TCGGACCAGAATGGAAAGCA-3’。利用本试剂盒进行实时荧光定量PCR扩增曲线呈现出良好的S型,只出现扩增产物特异性的单个峰,产物的Tm值都在78-79℃之间,说明没有引物二聚体及非特异性扩增产物出现;检测的灵敏度可达10拷贝/微升,且具有很好的重复性。