一种在大肠杆菌中制备线性单链DNA的方法
基本信息
| 申请号 | CN201610464596.X | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN106119269B | 公开（公告）日 | 2019-12-06 |
| 申请公布号 | CN106119269B | 申请公布日 | 2019-12-06 |
| 分类号 | C12N15/70（2006.01）; C12N15/113（2010.01）; C12N15/10（2006.01） | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张平静; 冯文建; 杨扬; 王晋康; 朱远源 | 申请（专利权）人 | 百奥迈科生物技术有限公司 |
| 代理机构 | 上海申浩律师事务所 | 代理人 | 百奥迈科生物技术有限公司 |
| 地址 | 226016 江苏省南通市经济技术开发区常兴路76号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种用于制备线性单链DNA的方法，其包括：构建可表达Cas切口酶的Cas表达元件，整合入质粒；构建可在大肠杆菌细胞中与上述Cas表达元件兼容的sgRNA基因转录表达元件，并构建成质粒，得到sgRNA表达质粒；将Cas切口酶表达质粒和sgRNA表达质粒共同转化到大肠杆菌感受态细胞中；培养大肠杆菌至对数生长期，诱导Cas切口酶基因表达和自杀性sgRNA表达，Cas切口酶协同sgRNA自剪切sgRNA表达质粒的双链DNA并形成单链断裂，产生线性单链DNA；提取线性单链DNA。 |
