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一种Micro RNA表达检测方法及其定量检测试剂盒

基本信息

申请号	CN201310036690.1	申请日	-
公开（公告）号	CN103205489B	公开（公告）日	2016-03-09
申请公布号	CN103205489B	申请公布日	2016-03-09
分类号	C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	姚远颋;王海峰;费倩岚;谈竹君;劳昕元	申请（专利权）人	上海黄离生物科技有限公司
代理机构	上海弼兴律师事务所	代理人	朱水平;沈利
地址	200233 上海市徐汇区桂平路333号6号楼306室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种Micro?RNA表达检测方法及其定量检测试剂盒。该方法包括：（1）提取样品的Micro?RNA，将该Micro?RNA连接PolyA尾巴；（2）将三条具有茎环结构的引物混合后退火处理，（3）将连有PolyA尾巴的Micro?RNA与具有茎环结构的引物退火连接，（4）以该Micro?RNA为模板反转录得到cDNA，（5）以该cDNA为模板，加入扩增目标Micro?RNA的引物，通过荧光定量PCR方法检测目标Micro?RNA表达。所述方法通过一次反转录可得到待测对象所有的Micro?RNA及内参基因，大大降低了引物二聚体以及复杂发卡结构的生成，大幅度提高了对Micro?RNA的检测效率。