一种siRNA表达载体及其应用

基本信息

申请号 CN201310038942.4 申请日 -
公开(公告)号 CN103205461B 公开(公告)日 2015-07-01
申请公布号 CN103205461B 申请公布日 2015-07-01
分类号 C12N15/85(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 姚远颋;王海峰;费倩岚;谈竹君;劳昕元 申请(专利权)人 上海黄离生物科技有限公司
代理机构 上海弼兴律师事务所 代理人 朱水平;沈利
地址 200233 上海市徐汇区桂平路333号6号楼306室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种用于构建siRNA表达载体的空载体及其重组载体和应用。该空载体从5’到3’依次包括:1)来源于CMV?RNA聚合酶II依赖型启动子序列;2)pri-MiR21前部片段序列SEQ?ID?NO.1;3)限制性内切酶酶切位点序列;4)pri-MiR21后部片段序列SEQ?ID?NO.2;5)终止子序列。在限制性内切酶酶切位点插入序列siRNA正义序列-MiR21环结构序列-siRNA反义序列,即得siRNA重组表达载体。本发明采用RNA?Pol?II启动子,可方便有效地将shRNA连接到pri-MiR21骨架上,使shRNA经由RNAPol?II启动子稳定表达,且表达高效,提高了RNAi的敲减效率。