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一种体外诱导扩增I型NKT细胞的方法

基本信息

申请号	CN201611031666.9	申请日	-
公开（公告）号	CN106434556B	公开（公告）日	2019-10-11
申请公布号	CN106434556B	申请公布日	2019-10-11
分类号	C12N5/0783	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	徐建青;张晓燕;王婧;朱凌燕	申请（专利权）人	上海新长安生物科技有限公司
代理机构	北京德崇智捷知识产权代理有限公司	代理人	上海新长安生物科技有限公司
地址	201508 上海市金山区山阳镇浦卫公路16299弄11号1层120室L3
法律状态	-

摘要

本发明涉及一种体外诱导扩增人I型NKT细胞的方法，采用“特异性刺激剂+分阶段细胞因子”的模式，由两个培养阶段构成，第一培养阶段以特异扩增I型NKT数量为主，使用特异性的刺激剂α‑GalCer对I型NKT细胞进行优势扩增，并以荷载α‑GalCer的CD1d表达细胞刺激I型NKT持续增殖，同时加入细胞因子IL‑2和IL‑7以辅助I型NKT生长；第二培养阶段同步进行I型NKT数量扩增与引导功能定向分化，以α‑GalCer孵育的CD1d表达细胞继续刺激I型NKT增殖，同时加入IL‑2、IL‑7与IL‑15，以辅助I型NKT细胞扩增并引导分化，培养结束前1‑2天在培养体系中，加入IL‑12以引导I型NKT细胞进一步定向分化，增强其杀伤活性。本发明所述方法操作简单，能在I型NKT细胞体外大量扩增的同时提高扩增产物的杀伤活性，适合规模化生产。