一种提高咖啡酸产量的生物制备方法

基本信息

申请号 CN202110654151.9 申请日 -
公开(公告)号 CN113355342A 公开(公告)日 2021-09-07
申请公布号 CN113355342A 申请公布日 2021-09-07
分类号 C12N15/70;C12N15/66;C12N15/53;C12N9/02;C12P7/42;C12R1/19 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 孙磊;张红 申请(专利权)人 徐州合谷生命科技有限公司
代理机构 南京聚匠知识产权代理有限公司 代理人 刘囝
地址 221000 江苏省徐州市沛县大屯街道办事处东环路西侧、龙湖大道北侧、上海路南侧320322号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种提高咖啡酸产量的生物制备方法,涉及生物发酵技术领域。本发明包括构建大肠杆菌基因工程菌、菌体活化、制备种子液、发酵罐培养、诱导表达和生物转化。本发明将SEQ ID NO.1所示的羟化酶基因的核苷酸序列,以pET20b为载体,构建重组质粒pET‑C4H,转入到Escherichia coli Tuner(DE3)中,经过筛选得到带有羟化酶基因的大肠杆菌基因工程菌strC4H,诱导表达产生羟化酶,以4‑香豆酸底物,在羟化酶的作用下,4‑香豆酸转化为咖啡酸,提高了咖啡酸的产量,且生物方法制备高效、无污染。