超敏化学发光酶免法测定人肿瘤可溶性蛋白sp185<SUP>Her－2</SUP>专利查询专利号|摘要-满商公司网

超敏化学发光酶免法测定人肿瘤可溶性蛋白sp185^Her－2

基本信息

申请号	CN200510056656.6	申请日	-
公开（公告）号	CN1731188A	公开（公告）日	2006-02-08
申请公布号	CN1731188A	申请公布日	2006-02-08
分类号	G01N33/574(2006.01);G01N33/543(2006.01);G01N21/76(2006.01)	分类	测量；测试;
发明人	蔡枫	申请（专利权）人	浙江亚克药业有限公司
代理机构	-	代理人	-
地址	310053浙江省杭州市滨江区滨康路677号
法律状态	-

摘要

本发明一种用超敏化学发光酶联免疫吸附定量测定人Her－2/Neu癌基因可溶性产物sp185^Her－2的方法。使用奥地利Bender MedSystemsGmbH公司的一对抗sp185^Her－2单克隆抗体，采纳固相双位点夹心式酶联免疫吸附技术，用抗sp185^Her－2单克隆抗体包埋小容量微孔后，样本中sp185^Her－2结合在包埋抗体上；加入辣根过氧化酶(HRP)联结的单克隆抗sp185^Her－2抗体后，它和已被第一抗体捕获的sp185^Her－2结合；孵育后洗除未结合的抗sp185^Her－2酶联结抗体；加入辣根过氧化酶超敏化学发光底物后；通过化学发光仪测定425nm处发光量来定量样本中sp185^Her－2浓度。本法检测线性范围0－10ng/mlsp185^Her－2(R²＝0.9999)，最低检测限度40.15pg/ml sp185^Her－2。本发明改进Bender MedSystems ELISA，采用小容量微孔板，在不影响反应敏感性的前提下，减少了包埋抗体和其他反应试剂的使用量，加快了反应速度；采用超敏化学发光底物和化学发光仪，加宽了检测线性范围，使检测限度下移，提高了反应敏感性。人血清Her－2/Neu癌基因可溶性产物sp185^Her－的测定，实时观察乳腺癌患者术后sp185^Her－含量的变化，有助于预后的临床评估。本发明为进一步研发临床适用的诊断试剂盒奠定了基础。