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大规模干细胞培养方法

基本信息

申请号	CN202010230993.7	申请日	-
公开（公告）号	CN111394300B	公开（公告）日	2021-11-26
申请公布号	CN111394300B	申请公布日	2021-11-26
分类号	C12N5/071;C12M3/00;C12M1/36;C12M1/26;C12M1/24;C12M1/12;C12M1/00	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	曹毓琳;贺伟;滕睿頔;王颖;张嗣良;张立新;白志惠;赵宇红;杨光;贾福强	申请（专利权）人	北京臻溪谷医学研究中心（有限合伙）
代理机构	北京卓爱普专利代理事务所（特殊普通合伙）	代理人	王玉松;宋丹丹
地址	100010 北京市西城区西什库大街31号院23号楼2层201
法律状态	-

摘要

本发明提供了一种大规模干细胞培养方法，该方法包括以下步骤：将3D微胶囊溶胀，3D微胶囊呈蜂巢状，直径为0.5‑10mm，微囊的孔径为10nm‑10000nm；将单细胞悬液接种于溶胀后的3D微胶囊，干细胞的接种密度为1‑8×10⁵个/ml，再用扩增培养基对干细胞进行扩增培养，培养条件如下：静态培养1‑3天，静态培养时的搅拌速度调至50‑70RPM、pH调至7.0、DO50％、温度为37±1℃，每隔2天补加一次培养基，灌流培养3‑5天，灌流培养时的灌流流速由0.8vvd升至2vvd，调节搅拌速度升至100rpm，每隔2天补加一次培养基；用3D微胶囊溶解剂进行解囊；收获扩增细胞；本发明提供的大规模干细胞培养方法能够解决大规模培养时细胞难以收获的问题，且使用该方法培养的干细胞增殖效果好、活率高，收获时间短。