一种诱导脂肪干细胞成软骨分化的培养方法和培养液专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种诱导脂肪干细胞成软骨分化的培养方法和培养液

基本信息

申请号	CN201810265912.X	申请日	-
公开（公告）号	CN108410803B	公开（公告）日	2019-02-05
申请公布号	CN108410803B	申请公布日	2019-02-05
分类号	C12N5/077;C12N5/0775	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	田红青	申请（专利权）人	南京千年健干细胞基因工程有限公司
代理机构	深圳市兰锋知识产权代理事务所（普通合伙）	代理人	湖南源品细胞生物科技有限公司
地址	410100 湖南省长沙市长沙县长沙经济技术开发区泉塘街道漓湘路98号宿舍楼205
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种诱导脂肪干细胞成软骨分化的培养方法和培养液，包括如下步骤：(1)取皮下脂肪组织，冲洗、除去脂肪组织膜和血管剪成碎块，酶消化，加入完全培养基，离心去除脂肪细胞及脂滴，重悬于完全培养基，接种于培养瓶中培养24h后换培养液除去未贴壁细胞，每3天换液，细胞融合后用0.25％胰酶和1mmol/L EDTA 37℃消化3～5min，完全培养基终止消化，1:2比例传代；(2)传代细胞接种于含有完全培养基的培养瓶培养48h后更换培养基为不完全培养基，加入Sox9基因激活剂继续培养，每3d换一次培养基。本发明提供的方法可以有效诱导脂肪干细胞成软骨分化，可以以脂肪干细胞为种子细胞制备得到大量软骨细胞以满足临床对软骨细胞的需求。