一种提高骨髓间充质干细胞增殖率的方法

基本信息

申请号 CN201810261745.1 申请日 -
公开(公告)号 CN108486049B 公开(公告)日 2019-05-31
申请公布号 CN108486049B 申请公布日 2019-05-31
分类号 C12N5/0775(2010.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 田红青 申请(专利权)人 南京千年健干细胞基因工程有限公司
代理机构 北京卓特专利代理事务所(普通合伙) 代理人 吉林奥唯姿生物医学工程有限公司
地址 130000 吉林省长春市北湖科技开发区盛北大街3333号北湖科技园产业一期B3二楼22-3号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种提高骨髓间充质干细胞增殖率的方法,包括如下步骤:(1)将人骨髓小心叠加于等体积的淋巴细胞分离液上层,4℃条件2000r/min离心20min,吸取分离液和血浆界面云雾状的单个核细胞层,用无血清IMDM悬浮后,以1000r/min离心,按2×105/cm2密度接种于培养瓶中培养,48h后换液,将不贴壁的细胞洗去,贴壁细胞每3d换液,待细胞融合度达80%以上时,用胰酶消化传代;(2)取传代细胞以2×104/cm2的密度接种于含有无血清IMDM的培养瓶中,37℃,5%CO2培养48h后,加入miR‑196a表达抑制剂继续培养24~72h。本发明提供的方法比常规培养方法具有更高的骨髓间充质干细胞增殖率,有助于较快获得大量骨髓间充质干细胞用于干细胞移植等手术治疗。