一种稳定高表达蛋白的单拷贝细胞株的构建方法及其应用
基本信息
| 申请号 | CN202010909945.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112175993A | 公开（公告）日 | 2021-01-05 |
| 申请公布号 | CN112175993A | 申请公布日 | 2021-01-05 |
| 分类号 | C12N15/85(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 杭海英;蒋薇;赵云;安莉莉 | 申请（专利权）人 | 海珂分子（北京）科技有限责任公司 |
| 代理机构 | 北京市诚辉律师事务所 | 代理人 | 范盈 |
| 地址 | 101400北京市怀柔区雁栖经济开发区雁栖大街53号院10号楼二层201-15室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供一种稳定高表达蛋白的单拷贝细胞株的构建方法及其应用，所述方法基于293T细胞的可以快速精确插入且能稳定高水平表达目的基因。所述方法通过随机插入结合高通量筛选策略建立了一个稳定、高效表达且可替换目的基因的293T细胞株。基于此细胞株，我们成功表达了属于GPCR家族之一的腺苷A2A受体蛋白(ADORA2A)。利用这种方法可以进行反复的盒式重组替换，可将欲被表达或优化的抗体或别的蛋白质基因快速准确地插入到该细胞基因盒中，且不会破坏基因框的完整性。 |
