一种抗人CD25嵌合单克隆抗体及其制备方法和应用专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种抗人CD25嵌合单克隆抗体及其制备方法和应用

基本信息

申请号	CN201611167733.X	申请日	-
公开（公告）号	CN108084263B	公开（公告）日	2021-07-13
申请公布号	CN108084263B	申请公布日	2021-07-13
分类号	C07K16/28;A61K39/395;A61P35/00	分类	有机化学〔2〕;
发明人	张学光	申请（专利权）人	苏州旭光科星抗体生物科技有限公司
代理机构	上海精晟知识产权代理有限公司	代理人	冯子玲
地址	215000 江苏省苏州市苏州高新区锦峰路8号12号楼302室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种抗人CD25嵌合单克隆抗体及其制备方法，包含编码所述抗体的可变区的氨基酸序列，制备方法，抗体功能鉴定。本发明从分泌抗人CD25单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取重链可变区（mVH）和轻链可变区（mVL），并与克隆载体（pJET cloning vector）连接，转化感受态细菌DH5a，根据测序结果保留候选的重轻链可变区序列，再次PCR扩增出与表达载体匹配的重链、轻链可变区序列，将PCR产物与双酶切预先处理的线性表达载体连接，连接产物转化感受态细菌DH5a，扩大培养后进行质粒抽提。连接有目的单抗重链和轻链可变区基因的表达载体共转染真核表达细胞株293。培养收获的上清含有目的抗体，流式检测表达单抗与PBMC结合良好，阳性率达95%以上，获得CD25鼠/人嵌合抗体。