一种能增殖和包装缺失E1基因重组猪3型腺病毒的细胞系及其构建方法

基本信息

申请号 CN201610255773.3 申请日 -
公开(公告)号 CN107304415A 公开(公告)日 2017-10-31
申请公布号 CN107304415A 申请公布日 2017-10-31
分类号 C12N5/10(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N7/00(2006.01)I;C12R1/91(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 张志刚;陈瑞;董剑辉 申请(专利权)人 北京康宝利华生物科技有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 101111 北京市大兴区经济技术开发区科创六街88号亦庄生物医药园A3座2层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种能增殖和包装缺失E1基因重组猪3型腺病毒的细胞系及其构建方法。本发明将构建含有HAV5 E1基因的载体转染至ST细胞后,用嘌呤霉素筛选得到细胞系ST‑E1。将含有PAV3 E1Blarge基因和I‑SceI基因的克隆载体与pMD2.G和psPAX2共转染至293T细胞,收集培养上清,感染ST‑E1细胞,用潮霉素进行筛选,得到细胞系ST‑E1‑E1Blarge‑ISceI。本发明ST‑E1‑E1Blarge‑ISceI细胞系与加拿大VIDO动物疫苗研究中心专利保护细胞系VR1BL相比,能实现ΔE1 PAV3的高效增殖及其成功包装,因此可极大促进ΔE1 PAV3的口服疫苗和基因递送系统研究。