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出生缺陷细胞库及其构建方法

基本信息

申请号	CN200910152257.8	申请日	-
公开（公告）号	CN101942413B	公开（公告）日	2015-02-11
申请公布号	CN101942413B	申请公布日	2015-02-11
分类号	C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	翁炳焕	申请（专利权）人	浙江同创医疗科技有限公司
代理机构	-	代理人	-
地址	310000 浙江省杭州市下城区华中南路672号3幢405、501室
法律状态	-

摘要

本发明涉及用于医学领域的出生缺陷细胞库及其构建方法，其主要特征是以BamH?I、SV40?DNA、T4?DNA连接酶和基因载体pcDNA3.1构建SV40T/pcDNA3.1重组子，经感受态大肠杆菌扩增、纯化后，以脂质体转染法将重组子导入经0.01％胶原酶II消化的离体悬液状出生缺陷细胞或在含20％胎牛血清、5～10nmol/L胰岛素的培养液中处于将进入或刚进入对数生长期、梭形细胞占90％以上、汇合率达55％～65％的贴壁生长状出生缺陷细胞，并与之DNA整合，以G418筛选的含阳性重组子的细胞和EB病毒转染的细胞作传代、扩增培养，构建出生缺陷细胞系并冻存于液氮中，以出生缺陷(Birth?Defect)及其病种的第一个英文字母命名并标明相关资料信息，用以集中保存出生缺陷的活细胞资源，解决其科研材料贫乏和无专一出生缺陷细胞库的问题。