出生缺陷细胞库及其构建方法
基本信息
申请号 | CN200910152257.8 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN101942413A | 公开(公告)日 | 2011-01-12 |
申请公布号 | CN101942413A | 申请公布日 | 2011-01-12 |
分类号 | C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 翁炳焕 | 申请(专利权)人 | 浙江同创医疗科技有限公司 |
代理机构 | - | 代理人 | - |
地址 | 310000 浙江省杭州市下城区华中南路672号3幢405、501室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及用于医学领域的出生缺陷细胞库及其构建方法,其主要特征是以BamH?I、SV40?DNA、T4?DNA连接酶和基因载体pcDNA3.1构建SV40T/pcDNA3.1重组子,经感受态大肠杆菌扩增、纯化后,以脂质体转染法将重组子导入经0.01%胶原酶II消化的离体悬液状出生缺陷细胞或在含20%胎牛血清、5~10nmol/L胰岛素的培养液中处于将进入或刚进入对数生长期、梭形细胞占90%以上、汇合率达55%~65%的贴壁生长状出生缺陷细胞,并与之DNA整合,以G418筛选的含阳性重组子的细胞和EB病毒转染的细胞作传代、扩增培养,构建出生缺陷细胞系并冻存于液氮中,以出生缺陷(Birth?Defect)及其病种的第一个英文字母命名并标明相关资料信息,用以集中保存出生缺陷的活细胞资源,解决其科研材料贫乏和无专一出生缺陷细胞库的问题。 |
