一种丙氨酸消旋酶的突变体酶蛋白及其制备方法
基本信息
| 申请号 | CN201910691113.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN110669751B | 公开（公告）日 | 2022-06-14 |
| 申请公布号 | CN110669751B | 申请公布日 | 2022-06-14 |
| 分类号 | C12N9/90（2006.01）I;C12N15/60（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12P13/06（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 鞠建松;韩卿卿;徐书景;任晓朴;窦金萍;郭博涵;何广正;赵宝华 | 申请（专利权）人 | 河北师范大学 |
| 代理机构 | 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 | 代理人 | - |
| 地址 | 050024河北省石家庄市南二环东路20号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种丙氨酸消旋酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列二级结构比对结果，通过定点突变技术将腾冲嗜热厌氧菌中丙氨酸消旋酶的173、360两个位点分别突变，构建双点突变表达载体pET‑S173Q/Q360Y，通过原核表达、纯化获得酶蛋白。所获得的突变体蛋白对底物L‑Ala的表观二级速率常数kcat/Km为18.44 s‑1·mM‑1，平衡常数Keq（L/D）为3.95，是野生型蛋白的68.30和3.69倍，且突变体蛋白的半衰期也有一定程度的提升。由于突变体蛋白可以提高反应产物D‑Ala的转化效率，因此，本突变体可以作为生物合成D‑Ala的元器件，有较好的应用价值。 |
