艰难梭菌外毒素A羧基端序列密码子优化基因片段、表达载体构建方法及其表达蛋白的应用
基本信息
| 申请号 | CN201210568057.2 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN103865938B | 公开（公告）日 | 2016-10-05 |
| 申请公布号 | CN103865938B | 申请公布日 | 2016-10-05 |
| 分类号 | C12N15/31(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C07K16/12(2006.01)I;A61K39/08(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 刘红;冯东晓;邢平平;徐从伦;李敏;郭桂平;于锦丽;赵志伟 | 申请（专利权）人 | 绿叶投资集团有限公司 |
| 代理机构 | - | 代理人 | - |
| 地址 | 264670 山东省烟台市高新区科技大道39号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及密码子改造的艰难梭菌外毒素A羧基端基因片段、表达载体构建方法及其在大肠杆菌中的高效表达。该密码子改造后的基因序列既兼顾大肠杆菌密码子使用偏好，又降低了原始基因重复序列对于基因合成和表达的影响。本研究所涉及的高效表达载体由密码子改造后的艰难梭菌外毒素A羧基端基因与原核表达载体pET32b(+)组成，经IPTG诱导后可以高表达出带His标签的融合蛋白。该融合蛋白经凝血酶酶切后可以释放艰难梭菌外毒素A羧基端约872个氨基酸片段。本研究中经密码子改造的艰难梭菌外毒素A羧基端基因片段可以大肠杆菌中高效融合表达，纯化后的蛋白作为抗原可用于制备抗艰难梭菌外毒素A抗体和抗艰难梭菌感染疫苗的制备。 |
