一种重组SLO蛋白及其制备方法
基本信息
申请号 | CN201410349271.8 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN104098659A | 公开(公告)日 | 2014-10-15 |
申请公布号 | CN104098659A | 申请公布日 | 2014-10-15 |
分类号 | C07K14/315(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I | 分类 | 有机化学〔2〕; |
发明人 | 阳艳华;黄英星 | 申请(专利权)人 | 桂林英美特生物技术有限公司 |
代理机构 | 桂林市持衡专利商标事务所有限公司 | 代理人 | 桂林英美特生物技术有限公司 |
地址 | 541004 广西壮族自治区桂林市高新区信息产业园D-02号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种重组SLO蛋白及其制备方法。所述的制备方法包括:1)SLO基因的扩增及SLO-pGEX-2T表达质粒的构建;2)重组表达质粒转染大肠杆菌及阳性工程菌的筛选;3)阳性工程菌的扩大培养和诱导表达;4)表达菌液的收集、裂解并采用DEAE-Sepharose阴离子交换柱纯化技术纯化目的重组蛋白。本发明采用pGEX-2T表达质粒与SLO基因进行重组,然后转染大肠杆菌,经过发酵每升菌液可以获得100mg以上的可溶性重组SLO蛋白,产率高;采用DEAE-Sepharose阴离子交换柱纯化技术,两次纯化操作即可获得纯度大于90%的重组SLO蛋白,与亲和层析相比,处理量更大,成本更低。 |
