一种肿瘤免疫治疗效果的基因检测方法

基本信息

申请号 CN201310690714.5 申请日 -
公开(公告)号 CN103865998A 公开(公告)日 2014-06-18
申请公布号 CN103865998A 申请公布日 2014-06-18
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 周菊华 申请(专利权)人 杭州赫思缇生物科技有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 310013 浙江省杭州市西湖区外东山弄11号3幢1单元101室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种肿瘤免疫治疗效果的基因检测方法。该方法从抗肿瘤的淋巴细胞和来自癌症患者的外周血单个核细胞提取RNA样品,然后合成cDNA;再利用通用引物和T细胞受体特定引物来扩增T细胞受体β链基因可变区段;扩增后的T细胞受体β链基因可变区段产物,经纯化后克隆到pcDNA3.1/TA载体。然后克隆的载体转化到感染态细菌细胞,培养形成单克隆细菌群落。单克隆细菌群落进一步进行液体培养,分离纯化质粒DNA,用TCR-CB-50R引物进行T细胞受体β链基因可变区段的序列测定;或者单克隆细菌群落不经液体培养直接进行测序;最后进行序列比对,确定输入癌症患者体内的抗肿瘤淋巴细胞是否在病人存活,从而早期判断肿瘤免疫治疗的效果。