基于半连接PCR技术的二代测序文库构建方法及试剂盒
基本信息
| 申请号 | CN201910119367.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111575357A | 公开（公告）日 | 2020-08-25 |
| 申请公布号 | CN111575357A | 申请公布日 | 2020-08-25 |
| 分类号 | C12Q1/6869;C12Q1/686;C40B50/06 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 王力刚 | 申请（专利权）人 | 北京全谱医学检验实验室有限公司 |
| 代理机构 | - | 代理人 | - |
| 地址 | 100000 北京市大兴区亦庄经济技术开发区科创六街88号E2座101室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明属于分子生物学领域，涉及一种基于半连接PCR技术的二代测序文库构建方法及其应用。本发明实现方式有两种：（1）通过去除打断双链DNA 5’‑磷酸基团，阻断打断后DNA双链两5’端与接头连接；而接头的另一条链含有5’‑磷酸基团，能够与打断后DNA双链两3’端连接，从而实现半连接。（2）通过在连接接头的3’端进行分子修饰，此分子修饰可以阻断接头平末端3’端与打断后DNA的5’端连接。本发明在将双链DNA打断后，通过半连接的方式针对含有UBC序列的DNA区域进行扩增，同时引入测序接头，集合了三种方法的优势，还有效避免了不含UBC序列的形成测序文库，非特异扩增，片断分布不集中等缺点。 |
