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一种从血浆中制备人凝血酶原复合物的方法

基本信息

申请号	CN201710118663.7	申请日	-
公开（公告）号	CN106676089B	公开（公告）日	2020-01-10
申请公布号	CN106676089B	申请公布日	2020-01-10
分类号	C12N9/74	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	蒋桂香;朱光祖;胡川;骆燕容;罗观文;洪好武;梁栋立	申请（专利权）人	广东双林生物制药有限公司
代理机构	广州广信知识产权代理有限公司	代理人	张文雄
地址	524076 广东省湛江市东海岛新丰东路1号
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种从血浆中制备人凝血酶原复合物的方法。本发明采用DEAE A‑50凝胶从血浆中直接吸附出人凝血酶原复合物，将吸附后的A‑50凝胶装填在固定床层析柱内，装填好的层析柱使用蠕动泵泵入洗脱液进行在线洗涤和洗脱，洗脱液经S/D灭活，固定床层析柱二次层析纯化得到高纯度人凝血酶原复合物产品。本发明的方法通过凝胶装柱在线洗脱实现了洗脱流量和速度的精确控制，减少了开放式操作引起的污染，交叉污染，凝胶泄漏等问题，所得制品纯度更高，IX因子效价可达27IU/ml以上，IX因子比活性达0.8IU/mg蛋白以上。同时采用带有压差控制器和固形物自动剥离系统的自冲洗型过滤器，使整个过滤过程中压差稳定可控，对凝胶颗粒起到了较好的保护作用，过滤过程中流入血浆罐的碎胶粒显著减少，生产过程中的凝胶损耗可降低20％以上。