基于Sanger测序的黄热病毒全基因组测序方法、成套引物对和应用

基本信息

申请号 CN201911261692.4 申请日 -
公开(公告)号 CN110894555A 公开(公告)日 2020-03-20
申请公布号 CN110894555A 申请公布日 2020-03-20
分类号 C12Q1/70;C12Q1/6869;C12N15/11;C12R1/93 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 文洁 申请(专利权)人 奥维森基因科技(天津)有限公司
代理机构 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 代理人 李双艳
地址 300000 天津市自贸试验区中环西路86号中科天保智谷14号楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种基于Sanger测序的黄热病毒全基因组测序方法、成套引物对和应用,涉及病毒检测技术领域。该方法包括提供黄热病毒的cDNA;然后使用成套引物对对黄热病毒的cDNA进行PCR扩增,得到位于黄热病毒全基因组中不同区域的片段,相邻片段之间含有用于拼接的重叠区域;各片段拼接后的全序列覆盖黄热病毒全基因组全长;使用Sanger双脱氧链终止法对PCR扩增产物进行测序,然后对测序序列进行拼接。该测序方法操作简单,测序结果准确度高,用于检测黄热病毒减毒活疫苗中的毒株可以从基因组的序列水平上保证毒株没有发生突变,毒性没有发生改变,进而确保了疫苗生产的安全性。