CRISPR/Cas9载体组合及其在基因敲除中的应用

基本信息

申请号 CN201810139547.8 申请日 -
公开(公告)号 CN108220294A 公开(公告)日 2018-06-29
申请公布号 CN108220294A 申请公布日 2018-06-29
分类号 C12N15/113;C12N15/63;C12N15/66;C12N15/877;C12N15/90;A01K67/027 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 戴一凡;杨海元;王盈 申请(专利权)人 金佩奇生物科技(南京)有限公司
代理机构 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 代理人 南京医科大学;金佩奇生物科技(南京)有限公司
地址 211166 江苏省南京市江宁区龙眠大道101号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了SgRNA组合,包括特异性靶向GGTA1基因的SgRNA、特异性靶向CMAH基因的SgRNA和特异性靶向β4GalNT2基因的SgRNA;本发明还公开了CRISPR/Cas9载体组合,包括GGTA1‑CRISPR/Cas9载体、CMAH‑CRISPR/Cas9载体和β4GalNT2‑CRISPR/Cas9载体;本发明还公开了CRISPR/Cas9载体组合在敲除GGTA1基因、CMAH基因和β4GalNT2基因中的应用。通过设计特异性靶向的SgRNA序列,三个基因敲除效率分别为56%、63%和41%,敲除与免疫排斥反应有关的三个基因,得到三基因敲除猪,并取得其心脏瓣膜。