一种特异识别AAV9衣壳蛋白的多克隆抗体及制备方法
基本信息
| 申请号 | CN202210396426.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114685651A | 公开（公告）日 | 2022-07-01 |
| 申请公布号 | CN114685651A | 申请公布日 | 2022-07-01 |
| 分类号 | C07K16/08（2006.01）I;C07K16/06（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/35（2006.01）I;G01N33/569（2006.01）I | 分类 | 有机化学〔2〕; |
| 发明人 | 吕亚丰;曹春雨;李舒月;张浩;秦宇;杨建林;王静 | 申请（专利权）人 | 三峡大学 |
| 代理机构 | 宜昌市三峡专利事务所 | 代理人 | - |
| 地址 | 443002湖北省宜昌市西陵区大学路8号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供一种特异识别AAV9衣壳蛋白的多克隆抗体及制备方法，将8处AAV9衣壳可变区氨基酸序列依次连接即为本发明所指AAV9可变区VR的氨基酸序列SEQ ID NO.1，由氨基酸序列得到编码AAV9衣壳可变区的DNA序列如SEQ ID NO.2，将DNA序列插入到原核表达载体pET30a获得质粒pET30a‑AAV‑VR，转化大肠杆菌扩增，采用IPTG诱导表达多价抗原肽，在变性条件下经Ni‑NTA树脂进行纯化，然后透析复性，纯化得到AAV9可变区蛋白免疫日本大耳朵白兔，以此制备多克隆抗体，ELISA检测抗体效价，Western‑blot及细胞免疫荧光检测抗体的应用。抗体效价为1:10240000，该抗体能特异性识别AAV9衣壳蛋白序列。为后续AAV载体开发以及AAV生物学功能研究奠定了基础。 |
