检测肺炎链球菌的RPA方法、其专用引物和探针及用途

基本信息

申请号 CN202210164196.2 申请日 -
公开(公告)号 CN114480689A 公开(公告)日 2022-05-13
申请公布号 CN114480689A 申请公布日 2022-05-13
分类号 C12Q1/689(2018.01)I;C12Q1/6844(2018.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12R1/46(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 龚正华;唐敏;夏震遥;卢甜 申请(专利权)人 深圳市研元生物科技有限公司
代理机构 北京棘龙知识产权代理有限公司 代理人 -
地址 518125广东省深圳市宝安区航城街道三围社区航城大道159号航城创新创业园A4栋3A10
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种检测肺炎链球菌的RPA方法、其专用引物、探针和用途,其专用引物和探针是基于肺炎链球菌特异性保守序列设计的,具有SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的寡核苷酸序列。本发明首次将新型恒温扩增技术RPA应用于肺炎链球菌的检测中,该方法模拟体内DNA复制的酶反应过程,依赖特定的酶和蛋白组合,包括重组酶、单链结合蛋白和DNA聚合酶,对DNA模板进行扩增,可在37℃的恒温下实现特定核酸序列的扩增,扩增产物可通过侧向层析核酸试检测纸条实现可视化判别。本发明建立的检测方法灵敏度可达10拷贝数/μL,特异性高,对硬件设备的要求很低,且可在30min内完成检测,无需对样品进行复杂处理、适合现场检测,适于推广应用。