一种热启动Taq DNA聚合酶的制备方法

基本信息

申请号 CN201810651498.6 申请日 -
公开(公告)号 CN108949716A 公开(公告)日 2018-12-07
申请公布号 CN108949716A 申请公布日 2018-12-07
分类号 C12N9/12 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 郑春杨;刘金朝;申奥;张国林 申请(专利权)人 青岛康大爱博生物科技有限公司
代理机构 青岛华慧泽专利代理事务所(普通合伙) 代理人 马千会
地址 266000 山东省青岛市黄岛区滨海大道317号康大产业园
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开一种热启动TaqDNA聚合酶的制备方法,包括以下步骤:(1)将纯化的TaqDNA聚合酶作为底物包被,利用噬菌体展示技术进行三轮的淘选流程,得到富集的同底物具有高亲和力的阳性备选配体;(2)分析富集的阳性备选配体序列组成,同底物结构比对后,选择若干可以与之结合的阳性克隆,利用大肠杆菌体外表达系统表达得到系列阳性配体;(3)将体外表达得到的配体、TaqDNA和多克隆抗体按照3:3:1的比例混合后得到热启动TaqDNA聚合酶。本发明制备的热启动TaqDNA聚合酶,能够在最大限度保持酶活性的基础上常温更好的封闭酶的活性,在分子诊断多个平台上验证其使用效果优于传统的热启动TaqDNA聚合酶。