一种Cas蛋白特异结合靶标DNA、调控靶标基因转录的方法及试剂盒专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种Cas蛋白特异结合靶标DNA、调控靶标基因转录的方法及试剂盒

基本信息

申请号	CN201710152120.7	申请日	-
公开（公告）号	CN106978428A	公开（公告）日	2017-07-25
申请公布号	CN106978428A	申请公布日	2017-07-25
分类号	C12N15/63;C12N15/70	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	成秋香	申请（专利权）人	上海吐露港生物科技有限公司
代理机构	上海精晟知识产权代理有限公司	代理人	冯子玲
地址	201899 上海市嘉定区菊园新区树屏路588弄51号3012室
法律状态	-

摘要

本发明涉及一种Cas蛋白结合DNA的方法，尤其是能够方便、快速、高效地针对一个或者多个靶进行基因转录调控的方法、以及用于所述方法的试剂盒。确定基因组上的目标靶点，找到目标靶点左右区域内Cas蛋白（所述Cas蛋白为保留RNA酶活力、缺失DNA酶活力的Cas蛋白突变体）结合所需的PAM位点，针对所述PAM位点设计向导序列，确定所述Cas蛋白的同向重复序列，并构建转录所述同向重复序列与向导序列相连的crRNA序列的crRNA质粒；将Cas蛋白的编码基因与转录所述crRNA质粒在细胞内共表达，即可使Cas蛋白特异地结合到目标靶点。采用本发明的方法，可以抑制一个或多个靶标基因的转录，整个操作过程与CRISPR/dCas9相比，操作过程非常简单，且编辑效率与dCas9相当。