多能干细胞定向诱导分化为肝细胞的培养基及培养方法和用途

基本信息

申请号 CN202210113503.4 申请日 -
公开(公告)号 CN114480253A 公开(公告)日 2022-05-13
申请公布号 CN114480253A 申请公布日 2022-05-13
分类号 C12N5/071(2010.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 付建;江利香;杨佳银;刘雨晴 申请(专利权)人 深圳市三启生物技术有限公司
代理机构 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 -
地址 518100广东省深圳市宝安区西乡街道桃花源科技创新园A栋孵化楼115-124、127-130
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及细胞工程技术领域,具体涉及多能干细胞定向诱导分化为肝细胞的培养基及培养方法和用途。本发明提供一种培养基组合物,该培养基组合物中含有腺苷酸环化酶激活剂、ALK5抑制剂、生长因子、OSM等因子,利用该培养基能够大大提升由iPSC诱导分化获得的肝细胞的成熟度。表现为ASGR1+细胞比例提升,以及分泌ALB水平提升。本发明利用基因编辑和重组技术在ASGR1基因中添加报告基因,将含有这两种基因的载体导入多能干细胞,当多能干细胞诱导分化为肝细胞后,报告基因和ASGR1共表达,从而有助于检测ASGR1+肝细胞亚群在分化细胞中的比例,且利用FACS检测或分选ASGR1+细胞群,无需额外实验操作,细胞消化后可直接上机检测或分选,利用本发明的检测方法能实现高通量检测。