基于HEK293T克隆筛选的用于高滴度慢病毒生产的悬浮驯化方法
基本信息
申请号 | CN202111258035.1 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN113981007A | 公开(公告)日 | 2022-01-28 |
申请公布号 | CN113981007A | 申请公布日 | 2022-01-28 |
分类号 | C12N15/867(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 胡迪超;马红;隋礼丽;孔令洁 | 申请(专利权)人 | 苏州博腾生物制药有限公司 |
代理机构 | 苏州新知行知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人 | 郑丽玲 |
地址 | 215000江苏省苏州市苏州工业园区新平街388号腾飞创新园3号楼 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种基于HEK293T克隆筛选的用于高滴度慢病毒生产的悬浮驯化方法,包括以下步骤:S1适合慢病毒包装的HEK293T贴壁细胞的克隆筛选,筛选出侵染效率较高的前若干个克隆细胞,进行扩大培养并建库,S2对筛选的HEK293T贴壁细胞进行快速悬浮驯化,得到细胞活率93~98%,且细胞分散性较好、无明显聚集的悬浮驯化成功的HEK293T细胞;S3悬浮HEK293T高滴度慢病毒包装克隆细胞的筛选,筛选侵染效率高的病毒上清,所对应的克隆细胞即为慢病毒高产的悬浮HEK293T细胞克隆。本发明提供的基于HEK293T克隆筛选的用于高滴度慢病毒生产的悬浮驯化方法,能快速获得生产高滴度慢病毒的悬浮HEK293T细胞克隆,所获得的悬浮HEK293T细胞克隆能无血清悬浮培养和病毒包装,病毒滴度高,纯化效率高,易于放大生产。 |
