一种农杆菌介导的多主棒孢高效遗传转化方法

基本信息

申请号 CN201910559279.X 申请日 -
公开(公告)号 CN110257416A 公开(公告)日 2019-09-20
申请公布号 CN110257416A 申请公布日 2019-09-20
分类号 C12N15/80(2006.01)I; C12R1/645(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 高士刚; 戴富明; 曾蓉; 徐丽慧; 王良军; 杨晓峰 申请(专利权)人 上海润庄农业科技有限公司
代理机构 上海精晟知识产权代理有限公司 代理人 冯子玲
地址 201415 上海市奉贤区庄行镇叶庄公路888号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提出了一种农杆菌介导的多主棒孢高效遗传转化方法,包括:(1)多主棒孢孢子悬浮液的制备步骤;(2)双元载体pCAMBIA1300转化农杆菌AGL1感受态细胞;筛选、鉴定阳性农杆菌转化子;(3)活化上述阳性农杆菌转化子,然后将单菌落转到含利福平和卡那霉素的LB液体培养基中培养;(4)制备阳性农杆菌转化子菌液;(5)混合菌液,并进行孵育;之后在含有乙酰丁香酮的IM培养基中培养;(6)多主棒孢阳性转化子的抗性筛选。本发明的方法转化效率高,操作简单。