重组蛋白A基因及其表达产物的制备

基本信息

申请号 CN200810240553.9 申请日 -
公开(公告)号 CN101760466B 公开(公告)日 2015-12-09
申请公布号 CN101760466B 申请公布日 2015-12-09
分类号 C12N15/31(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K14/31(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 宫照龙;何新舟;曹晖;许允立 申请(专利权)人 本元正阳基因技术有限公司
代理机构 北京尚诚知识产权代理有限公司 代理人 本元正阳基因技术有限公司
地址 100176 北京市大兴区北京经济技术开发区永昌中路6号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于生物工程技术领域。本发明是将蛋白A的B结构域基因单体根据大肠杆菌密码子的偏爱性进行优化,构建六串体插入热诱导型大肠杆菌载体pBV220,构建了含有该基因的大肠杆菌表达载体及其转化的大肠杆菌DH5α重组株和利用此菌株生产重组蛋白A的方法。此菌株所产生的可溶性重组蛋白A达到细菌可溶性蛋白总量的80%以上,以后只经镍离子螯合层析和分子筛柱层析即可将重组蛋白A纯化到95%以上纯度,且该蛋白具有表达量高、成本低、易纯化等优点。用其制备的重组蛋白A亲和填料具有人IgG吸附载量高、proA脱落少等优点。本发明为获得质量高且价格便宜的抗体(药物)纯化介质重组蛋白A提供了一条切实可行的途径。