犬原代脂肪间充质干细胞的无血清分离提取方法
基本信息
申请号 | CN202010439534.X | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN111440766A | 公开(公告)日 | 2020-07-24 |
申请公布号 | CN111440766A | 申请公布日 | 2020-07-24 |
分类号 | C12N5/0775(2010.01)I | 分类 | - |
发明人 | 张树义;赵文亮;王喆;孙玉忠;张宏 | 申请(专利权)人 | 辽宁派美特生物技术有限公司 |
代理机构 | 北京八月瓜知识产权代理有限公司 | 代理人 | 沈阳农业大学;辽宁派美特生物技术有限公司 |
地址 | 110011辽宁省沈阳市沈河区东陵路120号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了犬原代脂肪间充质干细胞的无血清分离提取方法,包括以下步骤:S1:实验前培养箱、实验用具灭菌,试剂提前配置好,在基础培养基中添加脂肪MSC添加因子和1%PS,即双抗,制备成完全培养基,室温放置;S2:通过外科手术在犬腹部或腹股沟处取皮下脂肪10ml;S3:20mlPBS,即磷酸缓冲盐溶液,加1%PS置于冰盒中带回实验室放入超净台中;S4:PBS冲洗3次直到液体无血色后剔除筋膜和血管将脂肪放在培养皿中剪成糊状;S5:将剪好的脂肪放入50ml离心管内,PBS反复清洗,在1000r/min离心5min去上清;本发明的目的在于提供犬原代脂肪间充质干细胞的无血清分离提取方法,提供了一种安全、简单方便、高质量、高纯度的犬脂肪间充质干细胞的提取培养体系。 |
