一种高效提取厌氧颗粒污泥微生物总RNA的方法
基本信息
申请号 | CN201310724606.5 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN103695414B | 公开(公告)日 | 2016-06-08 |
申请公布号 | CN103695414B | 申请公布日 | 2016-06-08 |
分类号 | C12N15/10(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 姬丹丹;臧立华;薛嵘;李肖玲 | 申请(专利权)人 | 吉林梅花氨基酸有限责任公司 |
代理机构 | 济南圣达知识产权代理有限公司 | 代理人 | 李健康 |
地址 | 250353 山东省济南市长清区大学路3501号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明属于环境分子生物学技术领域,涉及一种高效提取厌氧颗粒污泥微生物总RNA的方法,取活性污泥离心,弃上清,然后向离心管内加入灭菌玻璃珠和贮存液Ⅰ,将离心管管盖拧紧后置于旋涡混合器击打,离心弃上清,磷酸盐缓冲液洗涤;加入贮存液Ⅱ温育;加入TRIzol,漩涡振荡后离心取上清,加入氯仿,漩涡振荡,室温放置并离心取上清,加入异丙醇,-20℃放置后离心弃上清,加入75%乙醇洗涤沉淀,离心弃上清,风干沉淀,贮存液Ⅲ溶解核酸沉淀,加入DNase?I(RNase?free)和RNase抑制剂,采用RNA纯化试剂盒纯化RNA。简化了微生物总RNA提取步骤,实现了快速、高效的提取厌氧颗粒污泥的微生物总RNA。 |