一种高效提取厌氧颗粒污泥微生物总RNA的方法
基本信息
| 申请号 | CN201310724606.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN103695414A | 公开（公告）日 | 2014-04-02 |
| 申请公布号 | CN103695414A | 申请公布日 | 2014-04-02 |
| 分类号 | C12N15/10(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 姬丹丹;臧立华;薛嵘;李肖玲 | 申请（专利权）人 | 吉林梅花氨基酸有限责任公司 |
| 代理机构 | 济南圣达知识产权代理有限公司 | 代理人 | 齐鲁工业大学 |
| 地址 | 250353 山东省济南市长清区大学路3501号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明属于环境分子生物学技术领域，涉及一种高效提取厌氧颗粒污泥微生物总RNA的方法，取活性污泥离心，弃上清，然后向离心管内加入灭菌玻璃珠和贮存液Ⅰ，将离心管管盖拧紧后置于旋涡混合器击打，离心弃上清，磷酸盐缓冲液洗涤；加入贮存液Ⅱ温育；加入TRIzol，漩涡振荡后离心取上清，加入氯仿，漩涡振荡，室温放置并离心取上清，加入异丙醇，－20℃放置后离心弃上清，加入75％乙醇洗涤沉淀，离心弃上清，风干沉淀，贮存液Ⅲ溶解核酸沉淀，加入DNase?I(RNase?free)和RNase抑制剂，采用RNA纯化试剂盒纯化RNA。简化了微生物总RNA提取步骤，实现了快速、高效的提取厌氧颗粒污泥的微生物总RNA。 |
