一种高效提取厌氧颗粒污泥微生物总DNA的方法

基本信息

申请号 CN201310722060.X 申请日 -
公开(公告)号 CN103710337A 公开(公告)日 2014-04-09
申请公布号 CN103710337A 申请公布日 2014-04-09
分类号 C12N15/10(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 姬丹丹;臧立华;薛嵘;李肖玲 申请(专利权)人 吉林梅花氨基酸有限责任公司
代理机构 济南圣达知识产权代理有限公司 代理人 齐鲁工业大学
地址 250353 山东省济南市长清区大学路3501号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于环境分子生物学技术领域,具体涉及一种高效提取厌氧颗粒污泥微生物总DNA的方法,步骤如下:菌体离心;固体物用DNA贮存液I洗后加入DNA贮存液Ⅰ、溶菌酶温育,加入贮存液Ⅱ、贮存液Ⅲ、贮存液Ⅳ温育;加入酚、氯仿和异戊醇混合液,轻柔8字混匀;离心取上清,加入氯仿和异戊醇混合液,轻柔8字混匀;离心取上清,加入异丙醇,轻柔混匀,-20℃,静置30min;室温离心;75%乙醇洗一遍,室温离心12000r/min,5min;加入贮存液Ⅴ重悬,4℃过夜溶解,即得厌氧颗粒污泥微生物总DNA。本发明简化了微生物总DNA提取步骤,实现了快速、高效的提取厌氧颗粒污泥的微生物总DNA。