完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法

基本信息

申请号 CN201410387213.4 申请日 -
公开(公告)号 CN104186460B 公开(公告)日 2016-05-25
申请公布号 CN104186460B 申请公布日 2016-05-25
分类号 A01N1/02(2006.01)I 分类 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼;
发明人 孙黎;张弓;王通;金静洁 申请(专利权)人 武汉承启医学科技有限公司
代理机构 广州市华学知识产权代理有限公司 代理人 苏运贞;陈燕娴
地址 510632 广东省广州市黄埔大道西601号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法。该方法是在正常生长的细胞培养液中加入翻译延伸抑制剂,待翻译延伸抑制剂有效作用于RNC,抑制翻译延伸的进行后,将细胞冷却至0~4℃,再用预冷至0~4℃的PBS溶液清洗细胞以及加入细胞中,液氮中快速冷冻,超低温保存,于冰上解冻,再抽提RNC。本发明通过采用翻译延伸抑制剂有效固定核糖体,使之不易解离,将细胞内的翻译状况固定下来;再通过液氮急冻方法有效地冷冻保存RNC长期储存和运输,并且解冻后所提取的RNC与新鲜细胞提取的RNC无异,因此本发明突破了时间和空间的限制,为研究RNC及开展RNC商业服务提供了便利。