一种培养表达重组人表皮生长因子的工程菌的方法
基本信息
申请号 | CN201910897501.7 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN110564661A | 公开(公告)日 | 2019-12-13 |
申请公布号 | CN110564661A | 申请公布日 | 2019-12-13 |
分类号 | C12N1/21(2006.01); C12P21/02(2006.01); C12R1/19(2006.01) | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 钱永常; 张旭初; 宋叶华 | 申请(专利权)人 | 杭州纽龙生物科技有限公司 |
代理机构 | 北京德琦知识产权代理有限公司 | 代理人 | 杭州纽龙生物科技有限公司 |
地址 | 310018 浙江省杭州市萧山区宁围街道泰宏巷40号联合中心北区2幢601室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种培养表达重组人表皮生长因子的工程菌的方法,所述方法包括下述步骤:(1)一级种子培养,将甘油冻存的工程菌接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中,培养,得到一级种子培养液;(2)二级种子培养,将步骤(1)中得到的所述一级种子培养液接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中,培养,得到二级种子培养液;(3)将步骤(2)中得到的所述二级种子培养液接种至发酵罐中,培养,然后诱导,得到发酵罐上清液;和(4)从步骤(3)中得到的所述发酵罐上清液中分离和纯化重组人表皮生长因子。其中,所述一级种子培养液的OD600为2至3,并且所述二级种子培养液的OD600为3.5至4。通过本发明的方法,缩短了工程菌的发酵时间,提高了hEGF的产量。 |
