制备重组人源神经生长因子蛋白质的方法及复性液
基本信息
申请号 | CN201210080228.7 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN102628058B | 公开(公告)日 | 2013-06-26 |
申请公布号 | CN102628058B | 申请公布日 | 2013-06-26 |
分类号 | C12N15/70(2006.01)I;C07K14/48(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 钱永常 | 申请(专利权)人 | 杭州纽龙生物科技有限公司 |
代理机构 | 北京德琦知识产权代理有限公司 | 代理人 | 杭州纽龙生物科技有限公司 |
地址 | 311200 浙江省杭州市萧山区北干街道金城路1038号13-3室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及制备重组人源神经生长因子(rhNGF)蛋白质的方法及复性液,所述方法包括通过工程大肠杆菌表达rhNGF蛋白质,破碎表达rhNGF蛋白质的工程大肠杆菌菌体,离心收集rhNGF蛋白质包涵体,利用变性体系变性溶解包涵体以形成包涵体溶解后溶液,复性液以大于1080ml/min的流速加入到包涵体溶解后溶液中进行复性,纯化rhNGF蛋白质。所述复性液包含45~55mMTris-HCl,0~10mMβ-巯基乙醇,0~1mM二价铜盐,0.95~1.05mM?EDTA,pH8.5~10.0。本发明的方法通过复性液瞬间加入稀释复性提高了复性率,降低了生产成本,且操作简单。 |
