一种生产瑞替普酶的大肠杆菌培养方法
基本信息
申请号 | CN201310326179.5 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN104342396B | 公开(公告)日 | 2017-12-12 |
申请公布号 | CN104342396B | 申请公布日 | 2017-12-12 |
分类号 | C12N1/21(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 窦啟玲;窦雅琪;罗力;王军 | 申请(专利权)人 | 爱德药业(北京)有限公司 |
代理机构 | - | 代理人 | - |
地址 | 550008 贵州省贵阳市白云大道220-1号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及一种生产瑞替普酶的大肠杆菌培养方法,根据本发明的培养方法,包括以下步骤:1)通过三次扩增获得发酵工作种子液;2)发酵前准备:向发酵罐中添加泡敌、发酵培养基,将发酵工作种子液接种于发酵罐;3)发酵:控制发酵条件,当生长至OD600=20时,开始补料流加培养直至发酵结束;4)当OD600=30时,添加IPTG诱导表达,结束后离心,即得目的菌体。本发明采用的培养方法和培养基具有高稳定表达的特性,通过控制关键的发酵工艺条件,使表达水平较高,且工艺简便,稳定性好,易于工业化大生产。 |
