一种基于切刻酶的双链核酸等温扩增检测新方法

基本信息

申请号 CN201410529006.8 申请日 -
公开(公告)号 CN104726549A 公开(公告)日 2015-06-24
申请公布号 CN104726549A 申请公布日 2015-06-24
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 石超;马翠萍;刘琦;赵海杰 申请(专利权)人 青岛耐德生物技术有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 266000 山东省青岛市崂山区松岭路99号青岛科技大学
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及对双链核酸进行等温扩增及检测的方法,属于核酸检测领域。更具体的,涉及在切刻内切酶和聚合酶的联合作用下从双链核酸靶标扩增出单链靶标,并应用两条扩增引物和一条置换引物在等温条件下高效特异性扩增目标核酸的方法。本发明中通过对一条扩增引物与扩增模板退火区域的选择,实现了仅用三条引物就可完成对靶标核酸的高效特异扩增。并且模板的3’端与该引物完全互补,在提高了特异性的同时避免了传统技术中存在置换引物占据扩增引物互补位置而引起的阻滞扩增的问题。扩增引物还可以设计为分子信标的形式,只有被正确扩增的靶标序列才会与该种形式的引物退火并产生后续荧光信号,具有更好的特异性。